显微摄影-->qzq转移

雾里品花

显微摄影

    2002.12.05    

    显微摄影是通过显微镜来拍摄的方法。在动植物检疫工作上是科学研究、经验交流、仲裁谈判不可缺少的手段之一。

要取得良好的显微摄影效果，最重要的是要有良好的显微镜设备和良好的显微镜操作技术。

显微摄影时可以用带镜头的照相机，也可用不带镜头的照相机(但要装摄影目镜于镜筒上面)后者的使用更为普遍。显微摄影比微距摄影具有更大的物像放大比，一般由几十倍到上千倍（普通光学显微镜）。

显微摄影放大倍率可用下式计算：

B2 = B1L(mm)/250mm

式中，B1——显微镜的总放大倍数，等于物镜的倍数乘目镜的倍数。

B2——照片底片上影像的放大倍数。

L——目镜至底片的距离。

由上式可知，当底片与目镜距离为250mm时，底片上影像放大倍数与显微镜的倍数相等。

显微摄影中的正确曝光：曝光是显微摄影中的重要环节，曝光的正确与否决定着照片的质量。显微摄影时影响曝光的因素非常多，例如底片的性能，照明光源的强度和色温，照明方法，滤光片使用，物镜的孔径和倍数、物镜与摄影目镜的配合，照相机皮腔的伸长量，被摄标本的颜色和光学性质等等。难于用计算方法求得正确的曝光时间，通常采用试拍法测定。测定时先用毛玻璃对焦，观察毛玻璃面上的亮度，粗估一个曝光时间。装上有底片的暗合，关闭照明灯，将暗合抽开，开灯曝光1s；关灯，遮盖1/5的暗合，再开灯使余下的4/5干版继续曝光1s（总共2s），关灯，再关上1/5暗合，再开灯曝光2s（总共4s）；关灯，再关上1/5暗合，再开灯曝光4s（总共8s）；关灯；关上1/5暗合，再开灯将最后剩下的1/5面积底片曝光8s（总共16s），曝光完毕立即冲洗，冲洗后从深浅不同的条纹中选择反差最适当的，就是这种摄影条件下的正确曝光时间，一般试摄测定时，曝光时间多依几何级数增加，即1、2、4、8、16、32等（黑白胶卷易于冲洗）。

先进的光学显微镜均附设有全自动的摄影装置（如OLYMPUSR的PM-10AD）使用时只要按其操作指引便可获得良好的摄影效果。

显微镜数值孔径与曝光的关系（设数值孔径为0.5时曝光因素为1）

物镜的数值孔径
0.08
0.01
0.25
0.50
0.65
0.85
1.25

曝光因素近似值
40
25
4
1
2/3
1/3
1/8


显微镜倍率与曝光时间的关系（设10倍物镜曝光因素为1）

物镜放大倍数
5×
10×
15×
20×
25×
50×
75×
100×

曝光因素
40
25
4
1
2/3
1/3
1/8
 


适合显微摄影的显微镜：

1 照相目镜筒，要能承受得住显微摄影装置的重量。

2. 通过双目镜筒，要能对图象进行调焦。

3. 使用光路选择移动杆(Optical Path Selector)能将光亮调到适合标本需要的强度。

4. 物镜要有高分辩率和良好的平场象（整个圆型视场图象都在一个平面上）。

5. 载物台能够转动。

6. 聚光镜带有孔径光阑和调节光轴中心的机构。

7. 显微镜要有视场光阑。

8. 光源要保证有足够的亮度，可以按照观察和摄影的需要来调节光亮度。物镜从低倍到高倍变化时，要求光亮度都能均匀。

9. 显微镜体要有防止外界震动的能力。

10. 要备有插入滤色镜的槽口。

适合显微摄影的显微摄影装置：

1. 要有能够连接显微照相机附件的装置，如35mm照相机后背或大画面底片暗合。

2. 要能够按照摄影中需要的不同光亮条件进行光路调节。

3. 要能够对标本不同的面积进行测光（对30％面积的平均测光，或对１％面积的点测光）。

4. 要能够把照相机附件牢固地固定在显微镜上。

5. 要有色温的测定装置。

6. ISO/ASA感光度要有广泛的选择范围。

7. 要有倒易律失效补偿装置，可以进行长时间的自动曝光。

8. 要能够根据标本的具体情况，进行曝光量的调节。

9. 要能够进行手动曝光。

10. 要能装配特殊用途的装置，如拍16mm电影或35mm胶片的定时定格摄影装置。

11. 控制器内装有自动曝光锁机构。

适合显微镜摄影用的物镜与照相目镜物镜：

物镜：显微摄影需要有高分辩率、广视野平像场的物镜。长筒（Long-Barrel ，缩写LB）物镜如Splan-Apl-Chromat平像场复色差物镜，各系列。短筒(Short-barrel)物镜如Plan-Apl-Chromat平像场复消色差物镜、Plan-achromats平像场消色差物镜系列。这些物镜都是被推荐的。

照相目镜：照相目镜的作用，是为物镜的色差、象差作光学补偿，使投射到感光底片上的图象、四周与中心都尽可能在一个焦点平面上。因此，正确选用生产厂家推荐的照相目镜，是十分重的。

视场光阑的作用：视场光阑的作用，一是根据物镜的倍率给予不同直径的光束面积；二